Abstract: Standardizarea imunofenotipării necesită o atenție sporita la reactivi, la manipularea eșantioanelor, la configurarea instrumentelor și la analiza datelor și este esențială pentru succesul studiu încrucișat și compararea centrelor de date. Experții au dezvoltat cinci paneluri standardizate, cu opt culori, pentru identificarea subseturilor majore de celule imune din sângele periferic. Aceste paneluri au fost produse sub formă de reactivi preconfigurați, liofilizați, în plăci cu 96 de godeuri. Prezentăm rezultatele unei analize coordonate a probelor în nouă laboratoare care utilizează aceste paneluri cu proceduri de operare standardizate (SOP). Algoritmul manual de trasare a portilor a fost efectuat de fiecare site și de un site central. Algoritmii automatizați de trasare a portilor au fost dezvoltați și testați de consorțiul FlowCAP. Controlul manual centralizat poate reduce variabilitatea centrului transversal, și am căutat să stabilim dacă metodele automatizate ar putea eficientiza și standardiza analiza. Variabilitatea în cadrul site-ului a fost scăzută în toate experimentele, dar variabilitatea între site-uri a fost mai mică atunci când a fost efectuată analiza centrală în comparație cu analiza specifică a site-ului. De asemenea, a fost mai scăzut pentru subseturile celulare clar definite decât cele bazate pe markeri slabi și pentru populațiile rare. Trasarea automata a portilor a fost capabila să se potrivească cu performanța analizei manuale centrale pentru toate panelurile testate, prezentând părtinire puțina sau deloc și variabilitate comparabilă. Colorarea standardizată, colectarea de date și automatizarea porților pot crește puterea, reduce variabilitatea și simplifica analiza pentru imunofenotipare. dar variabilitatea între site-uri a fost mai mică atunci când a fost efectuată analiza centrală în comparație cu analiza specifică site-ului. De asemenea, a fost mai scăzut pentru subseturile celulare clar definite decât cele bazate pe markeri slabi și pentru populațiile rare.

Citeste articol